In Abhängigkeit von der nachzuweisenden Substanz werden die Extinktions-Messungen nach Empfehlung des Fotometer-Herstellers bei Licht einer bestimmten [[Wellenlänge]] durchgeführt. Ist diese Information nicht vorhanden, muss in einem Vorversuch das ''Absorptionsspektrum'' dieser Chemikalie ermittelt werden, d. h. der Absorptionsgrad α in % für eine sinnvolle Konzentration bei verschiedenen Wellenlängen. Für die nachfolgende Versuchsreihe wird die Wellenlänge gewählt, bei der der höchste Absorptionsgrad bestimmt wurde.
* Beispiel: Das Bild zeigt des Absorptionsspektrum des Indikators Kongorot im pH-Bereich > 6. Bei einer Konzentration von 0,01% zeigt sich die max. Extinktion bei ca. 500 nm.